本发明公开了一种猪IKKα多克隆抗体的制备方法和应用,属于生物技术领域。所述制备方法包括:将IKKα重组蛋白与弗氏佐剂等量混合乳化后,免疫动物得到多克隆抗体;其中,所述IKKα重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过构建猪源IKKα基因的原核和真核表达载体,制备特异性的多克隆抗体,验证了该多克隆抗体可以特异性结合IKKα因子的蛋白,并且CSFV感染PK‑15细胞后,IKKα因子的蛋白表达水平均显著提高。因此,本发明所制备的多克隆抗体可应用到检测或者诊断CSFV,同时也为深入探索和了解CSFV与IKKα蛋白互作及其在NF‑κB信号通路中的功能及细胞免疫机制奠定基础。